vijesti1

Razdvajanje podjedinica enzima agapurina poput trombina iz otrova Agkistrodon halys i sekvenciranje aminokiselinskih ostataka

[Sažetak] Cilj Odrediti N-terminalne 15 aminokiselinske ostatke dviju sličnih podjedinica agakutina.Dvije podjedinice molekule enzima moraju se razdvojiti kako bi se dobio jedan peptidni lanac podjedinice i sekvencirati.Metode Visoko pročišćeni agakutin dobiven je biokemijskom metodom.Uzorci pojedinačne podjedinice za identifikaciju i sekvenciranje pripremljeni su odvajanjem SDS-PAGE elektroforeze, izdvajanjem ljepljive trake podjedinice i tehnologijom elektrotransfera PVDF membrane.Potonji je odredio 15 aminokiselinskih ostataka na N-terminalu podjedinice Edmanovom degradacijskom metodom.Rezultati Slijed velike podjedinice (16 kDa) bio je DCSSGWSSYEEHQYY, a male podjedinice (15 kDa) bio je DSSGWSSYEGHEYYV.Zaključak Rezultati sekvenciranja pokazali su da je Agacutin novi enzim sličan trombinu zmijskog otrova pretragom NCBI baze podataka.


Vrijeme objave: 22. prosinca 2022